液相色譜柱在使用一段時間后,會出現(xiàn)一定的常見故障,如果不能很好的判斷并解決就會影響色譜柱的使用效果,從而影響樣品的分析結(jié)果。下面我們介紹下液相色譜柱壓力過高或者過低的處理方法:
一、柱壓問題柱壓問題是使用液相色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關(guān)。
1、液相色譜柱壓力過高:
這是液相在使用中常見的問題,指的是壓力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時,我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。
?。?)首先斷開真空泵的入口處,此時,PEEK管里充滿液體,使PEEK管低于溶劑瓶,看液體是否自由滴下,如果,液體不滴或緩慢滴下,則是溶劑過濾頭堵塞。
處理方法:
用30%的硝酸浸泡半個小時,在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下,溶劑過濾頭正常,再檢查;
(2)打開Purge閥,使流動相不經(jīng)過柱子,如果壓力沒有明顯下降,則是過濾白頭堵塞。
處理方法:
將過濾白頭取出,用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100PSI(6.7Bar)以下,過濾白頭正常,再檢查;
?。?)把色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。
處理方法:
如果是緩沖鹽堵塞,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,則要用比現(xiàn)在流動相更強(qiáng)的流動相沖至壓力正常。
假如,按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上,用流動相沖洗柱子。這時,如果柱壓仍不下降,只有換柱子入口篩板,但是,一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以,盡量少用。
2、液相色譜柱壓力過低
壓力過低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏
處理方法:
尋找各個接口處,特別是色譜柱兩端的接口,把泄漏的地方旋緊即可。當(dāng)然,還有一個原因就是泵里進(jìn)了空氣,但此時表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn),忽高忽低,更嚴(yán)重一點(diǎn)會導(dǎo)致泵無法吸上液體。
處理方法:
打開Purge閥,用3~5mL/min的流速沖洗,如果不行,則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。